一種金花茶CnFLS+反義F3’H雙基因載體構(gòu)建促進(jìn)植物黃酮醇合成的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011574583.0 申請日 -
公開（公告）號 CN112481277B 公開（公告）日 2022-06-24
申請公布號 CN112481277B 申請公布日 2022-06-24
分類號 C12N15/29;C12N15/113;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李紀(jì)元;姜麗娜;范正琪;殷恒福;李辛雷;童冉;劉偉新 申請（專利權(quán)）人 中國林業(yè)科學(xué)研究院亞熱帶林業(yè)研究所
代理機(jī)構(gòu) 杭州浙科專利事務(wù)所（普通合伙） 代理人 沈淵琪
地址 311400 浙江省杭州市富陽區(qū)富春街道大橋路73號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 一種金花茶CnFLS+反義F3’H雙基因載體構(gòu)建促進(jìn)植物黃酮醇合成的方法，屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域。該方法包括：1）克隆金花茶CnFLS基因，合成煙草反義表達(dá)F3’H基因的干擾序列；2）構(gòu)建CnFLS+反義F3’H雙基因載體；3）將CnFLS+反義F3’H雙基因載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌，測序正確后提取質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌中，采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葉盤法轉(zhuǎn)化本氏煙草；4）采用PCR鑒定轉(zhuǎn)基因煙草陽性株系，測定陽性株系中黃酮醇、多酚的含量。本發(fā)明過表達(dá)金花茶的CnFLS基因，同時設(shè)計(jì)干擾F3’H基因的表達(dá)，CnFLS基因過表達(dá)促進(jìn)合成黃酮醇，反義干擾F3’H基因的表達(dá)可抑制多酚、花青苷的合成，進(jìn)而能使植物的花色變黃。