同時(shí)誘導(dǎo)擴(kuò)增Vα24+iNKT細(xì)胞和CD3-CD56+NK細(xì)胞的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201410542883.9 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN104357391A 公開(公告)日 2015-02-18
申請(qǐng)公布號(hào) CN104357391A 申請(qǐng)公布日 2015-02-18
分類號(hào) C12N5/0783(2010.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 鄔冬云;楊新娟;廖嬈君 申請(qǐng)(專利權(quán))人 恒瑞源正(上海)生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京清亦華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 深圳源正細(xì)胞醫(yī)療技術(shù)有限公司;恒瑞源正(深圳)生物科技有限公司;恒瑞源正(上海)生物科技有限公司
地址 518057 廣東省深圳市南山區(qū)科技園北區(qū)松坪山路1號(hào)源興科技大廈南座15樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種同時(shí)誘導(dǎo)擴(kuò)增Vα24+iNKT細(xì)胞和CD3-CD56+NK細(xì)胞的方法,步驟如下:外周血分離PBMC,用含自體血漿的無血清培養(yǎng)基將PBMC濃度調(diào)整為2×106/ml,加入Anti-CD16抗體、-GalCer、IL-2、IL-18、IL-21后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),24小時(shí)后往細(xì)胞懸液加入Anti-CD3抗體,根據(jù)細(xì)胞的生長情況,每隔2天補(bǔ)充IL-2、IL-18、IL-21的無血清培養(yǎng)基,將細(xì)胞濃度控制在1.5×106/ml,持續(xù)培養(yǎng)14~21天后,即可同時(shí)獲得大量較高純度的Vα24+iNKT細(xì)胞和CD3-CD56+NK細(xì)胞,細(xì)胞數(shù)量能達(dá)到臨床用于腫瘤過繼性細(xì)胞免疫治療所需細(xì)胞數(shù)量的有效值。本發(fā)明簡便、有效。