一種RNA建庫的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011003145.9 申請日 -
公開（公告）號 CN112176421A 公開（公告）日 2021-01-05
申請公布號 CN112176421A 申請公布日 2021-01-05
分類號 C40B50/06;C12Q1/6806 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 馮延葉;李艷玲;郭仕妹;賴煦卉;孫大鵬 申請（專利權(quán)）人 上海英基生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 湖北天領(lǐng)艾匹律師事務(wù)所 代理人 上海英基生物科技有限公司
地址 201100 上海市閔行區(qū)園美路58號2幢4層、5層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種RNA建庫的方法及試劑盒，涉及基因測序領(lǐng)域。所述方法，包括以下步驟：1)合成First cDNA，形成DNA/RNA雜交鏈；2)用固定有Tn5轉(zhuǎn)座酶復(fù)合體的鏈霉親和素磁珠對First cDNA雜交鏈打斷并連接接頭；3)片段化的雜交鏈缺口補(bǔ)齊及PCR擴(kuò)增富集完整的文庫。本發(fā)明提供的方法不僅建庫過程操作簡單，最快可以實(shí)現(xiàn)2小時完成RNA建庫過程；而且，起始RNA的投入量比較靈活，打破了傳統(tǒng)的一種Tn5轉(zhuǎn)座酶量只針對特定的RNA的投入量進(jìn)行建庫的約束，降低轉(zhuǎn)座酶對模板投入的依賴性，可以根據(jù)自己需求投入10ng到1ug不同量的RNA。