一種改進的生物樣本中磷酸化肽段的鑒定及定量方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810287396.0 申請日 -
公開（公告）號 CN108548876A 公開（公告）日 2021-06-08
申請公布號 CN108548876A 申請公布日 2021-06-08
分類號 G01N30/02;G01N30/06;G01N30/08 分類 測量；測試;
發(fā)明人 胡立志;陳希;劉宜子;韓強強;尚駿;楊帆;楊中正;秦為輝 申請（專利權(quán)）人 武漢光谷創(chuàng)贏醫(yī)學檢驗實驗室有限公司
代理機構(gòu) 南京縱橫知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 徐瑛
地址 430075 湖北省武漢市東湖新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新大道666號生物創(chuàng)新園B5棟1-3層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開一種改進的生物樣本中磷酸化肽段的鑒定及定量方法，該方法利用雙甲基化標記技術(shù)實現(xiàn)相對定量并結(jié)合二氧化鈦富集技術(shù)對復雜生物樣本中含量極低的磷酸化肽段進行準確鑒定和定量；并將脫鹽和雙甲基化標記結(jié)合起來同時進行，減少了樣品制備過程，有利于磷酸化位點的保持；在二氧化鈦富集過程中，在上樣緩沖液中加入乙醇酸，能夠排除一些含有酸性氨基酸的肽段對磷酸化肽段的干擾，有利于提高富集效率；在脫鹽和富集過程中，將制好的柱子放入EP管中通過離心的方法使柱子中加入的液體流過填料代替?zhèn)鹘y(tǒng)的柱層析方法，不僅節(jié)約了實驗時間而且提高了一次處理樣品的通量，有利于大通量磷酸化肽段的鑒定及定量分析。