粗品羊肝素鈉中羊和豬基因含量的qPCR檢測(cè)方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910509895.4 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN112080553A 公開(kāi)（公告）日 2020-12-15
申請(qǐng)公布號(hào) CN112080553A 申請(qǐng)公布日 2020-12-15
分類號(hào) C12Q1/6851;C12Q1/6806 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 姚瑤;金永生;李小明;靳彩娟;姚亦明 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 蘇州融析生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 南京蘇科專利代理有限責(zé)任公司 代理人 蘇州融析生物科技有限公司
地址 215126 江蘇省蘇州市蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號(hào)生物納米園C19樓5層507室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種粗品羊肝素鈉中羊和豬基因含量的qPCR檢測(cè)方法，通過(guò)處理粗品羊肝素鈉樣品，分別得到用于測(cè)量羊DNA和豬DNA的溶液；其中用于測(cè)量豬DNA的溶液采用單獨(dú)的試劑盒提取對(duì)豬DNA進(jìn)行提??；并針對(duì)待測(cè)DNA溶液進(jìn)行PCR擴(kuò)增設(shè)計(jì)引物、PCR反應(yīng)體系及PCR反應(yīng)程序；最后分別使用羊DNA和豬DNA標(biāo)準(zhǔn)品制作相應(yīng)的DNA含量標(biāo)準(zhǔn)曲線，利用PCR擴(kuò)增制備的PCR模板，通過(guò)計(jì)算得到羊和豬DNA含量。本發(fā)明利用了TaqMan探針?lè)ㄟM(jìn)行檢測(cè)，靈敏度高、特異性好、操作簡(jiǎn)單。通過(guò)肝素酶和硫酸軟骨素酶組合酶解粗品羊肝素鈉，有效解除了肝素、硫酸軟骨素和硫酸皮膚素對(duì)PCR反應(yīng)的抑制；由于羊肝素鈉中豬DNA含量少，采用本發(fā)明提取方法，解決了微量豬DNA含量檢測(cè)準(zhǔn)確性問(wèn)題，效果顯著。