全基因組結(jié)合靶向擴(kuò)增建庫方法和試劑及病原檢測(cè)方法
基本信息
申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201910198649.1 | 申請(qǐng)日 | - |
公開(公告)號(hào) | CN111690639A | 公開(公告)日 | 2020-09-22 |
申請(qǐng)公布號(hào) | CN111690639A | 申請(qǐng)公布日 | 2020-09-22 |
分類號(hào) | C12N15/10(2006.01)I | 分類 | 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 江遙;鄒婧;崔望;曾晨曦;蔣慧 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 武漢華大智造科技有限公司 |
代理機(jī)構(gòu) | 深圳鼎合誠知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 彭愿潔;彭家恩 |
地址 | 430075湖北省武漢市東湖新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新二路388號(hào)武漢光谷國際生物醫(yī)藥企業(yè)加速器3-1期24棟 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 一種全基因組結(jié)合靶向擴(kuò)增建庫方法和試劑及病原檢測(cè)方法,建庫方法包括:獲取樣品全基因組DNA片段化后兩端連接上雙鏈接頭的接頭連接產(chǎn)物,其包括任選存在的目標(biāo)區(qū)域和非目標(biāo)區(qū)域;以接頭連接產(chǎn)物為模板,采用第一基因特異性引物和下游文庫擴(kuò)增通用引物進(jìn)行第一PCR擴(kuò)增獲得第一擴(kuò)增產(chǎn)物,第一基因特異性引物與目標(biāo)區(qū)域結(jié)合,下游文庫擴(kuò)增通用引物與雙鏈接頭的第一鏈結(jié)合;以第一擴(kuò)增產(chǎn)物為模板,采用第二基因特異性引物、下游文庫擴(kuò)增通用引物和上游文庫擴(kuò)增通用引物進(jìn)行第二PCR擴(kuò)增獲得第二擴(kuò)增產(chǎn)物,第二基因特異性引物與目標(biāo)區(qū)域結(jié)合,上游文庫擴(kuò)增通用引物與雙鏈接頭的第二鏈結(jié)合。本方法富集目標(biāo)區(qū)域,不影響非目標(biāo)區(qū)域,檢測(cè)成本低、效率高。?? |
