一種分子標(biāo)簽的制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201610496676.3 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN106119356A 公開(公告)日 2019-09-24
申請(qǐng)公布號(hào) CN106119356A 申請(qǐng)公布日 2019-09-24
分類號(hào) C12Q1/68 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王海龍;胡妮;徐健;唐元華 申請(qǐng)(專利權(quán))人 蘇州首度基因科技有限責(zé)任公司
代理機(jī)構(gòu) 蘇州市中南偉業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 馮瑞
地址 215123 江蘇省蘇州市工業(yè)園區(qū)星湖街218號(hào)生物納米園A3-118
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種分子標(biāo)簽的制備方法,包括以下步驟:在DNA分子模板的5′接頭端引入barcode序列;用DNA聚合酶延伸3′接頭端,與barcode序列互補(bǔ),得到補(bǔ)齊序列;向補(bǔ)齊序列中加入DNA聚合酶,在補(bǔ)齊序列的3′接頭端引入胸腺嘧啶,得到改造的接頭;將待測(cè)DNA破碎成DNA短片段,用DNA連接酶連接DNA短片段與改造的接頭,得到DNA連接產(chǎn)物;聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA連接產(chǎn)物,得到擴(kuò)增產(chǎn)物;對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序,然后比對(duì)到人類參考基因組,在多個(gè)DNA模板副本中選取堿基錯(cuò)誤率最低的DNA序列,即為分子標(biāo)簽。該分子標(biāo)簽技術(shù)通過改變barcode長(zhǎng)度,去除固定序列,減少測(cè)序中數(shù)據(jù)的浪費(fèi),提高了反應(yīng)速率,能有效區(qū)分DNA擴(kuò)增過程中的錯(cuò)誤和真實(shí)的DNA變異。