一種高純度經(jīng)血來源干細(xì)胞的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610422697.0 申請日 -
公開（公告）號 CN106011052A 公開（公告）日 2016-10-12
申請公布號 CN106011052A 申請公布日 2016-10-12
分類號 C12N5/074(2010.01)I;A01N1/02(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 葛劍云;汪土根;劉心星;黃啟明 申請（專利權(quán)）人 浙江奧比特生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 寧波市鄞州甬致專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 李迎春
地址 315000 浙江省寧波市高新區(qū)江南路1558號浙大科技園15層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種高純度經(jīng)血來源干細(xì)胞的制備方法：使用經(jīng)血采集套裝收集經(jīng)血；收集中間層單個(gè)核細(xì)胞；加入磁珠緩沖液，充分混勻后加入FcR試劑，孵育后再加入交聯(lián)抗人抗體的微磁珠試劑，混勻后孵育；再加入磁珠緩沖液，洗滌、離心后重懸于磁珠緩沖液中；加入到預(yù)先放置于磁性分選架的分選柱中，使用磁珠緩沖液沖柱洗滌；將分選柱取出，加入1.5?2ml磁珠緩沖液，收集細(xì)胞懸液；將所得懸液用經(jīng)血干細(xì)胞原代培養(yǎng)基培養(yǎng)，每2?3天半量換液一次；培養(yǎng)5?7天后消化收集貼壁細(xì)胞，用經(jīng)血干細(xì)胞傳代培養(yǎng)基繼續(xù)擴(kuò)增培養(yǎng)；消化所得細(xì)胞，加入凍存液進(jìn)行凍存。該方法獲得的經(jīng)血來源干細(xì)胞純度高，生長周期短，自我更新能力強(qiáng)、污染率低。