一種閃電克隆用反應(yīng)混合試劑及其制備方法和應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111049566.X 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN113667649A 公開(kāi)（公告）日 2021-11-19
申請(qǐng)公布號(hào) CN113667649A 申請(qǐng)公布日 2021-11-19
分類號(hào) C12N9/00（2006.01）I;C12N15/52（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N15/66（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 劉立成;吳剛;閆廣為;張治業(yè) 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 蘇州博特龍免疫技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京中政聯(lián)科專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 何磊
地址 215000江蘇省蘇州市漕湖街道觀塘路1號(hào)西交大漕湖科技園C幢810室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及分子克隆技術(shù)領(lǐng)域，具體是公開(kāi)了一種閃電克隆用反應(yīng)混合試劑及其制備方法和應(yīng)用，一種閃電克隆用反應(yīng)混合試劑，包括具有核酸外切功能的同源重組酶、DNA連接酶和反應(yīng)緩沖液；以總體系為20uL計(jì)，同源重組酶的用量是0.06uL?0.18uL，DNA連接酶的用量是0.03uL?0.15uL/總反應(yīng)體系，余量為反應(yīng)緩沖液；所述反應(yīng)緩沖液中各組分的質(zhì)量百分比為：Tris?HCl 10?16％、MgCl218?26％、K3P 5?15％、KCl 3?9％、NaCl 10?18％、二硫蘇糖醇8?12％、甘油15?30％。本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)的不足，采用同源重組酶將外源基因克隆至載體靶位點(diǎn)，本反應(yīng)混合試劑的準(zhǔn)確率更高，更為簡(jiǎn)單，使用方便，更為快速，且具有更高的克隆效率和穩(wěn)定性。