一種產(chǎn)磷脂酶D的基因工程菌及其構(gòu)建方法與在sdLDL-C檢測(cè)試劑盒開(kāi)發(fā)中的應(yīng)用
基本信息
申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202110144890.3 | 申請(qǐng)日 | - |
公開(kāi)(公告)號(hào) | CN112899178A | 公開(kāi)(公告)日 | 2021-06-04 |
申請(qǐng)公布號(hào) | CN112899178A | 申請(qǐng)公布日 | 2021-06-04 |
分類(lèi)號(hào) | C12N1/19;C12N9/16;C12N15/81;C12Q1/44;C12Q1/60;C12R1/84 | 分類(lèi) | 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 芮雙印;張艷鳳;符修樂(lè) | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 | 安徽大千生物工程有限公司 |
代理機(jī)構(gòu) | 合肥興東知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 李靜 |
地址 | 231200 安徽省合肥市經(jīng)開(kāi)區(qū)桃花工業(yè)園繁華大道工投·立恒工業(yè)廣場(chǎng)B12C | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明涉及基因工程技術(shù)領(lǐng)域,提供了一種產(chǎn)磷脂酶D的基因工程菌。本發(fā)明還提供了上述產(chǎn)磷脂酶D的基因工程菌的構(gòu)建方法,方法如下:優(yōu)化磷脂酶D基因密碼子、分析磷脂酶D基因糖基化位點(diǎn)、糖基化位點(diǎn)定點(diǎn)突變及全基因合成、獲得初步工程菌、質(zhì)粒抽提、畢赤酵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化、重組陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子的鑒定。同時(shí),本發(fā)明還提供了上述產(chǎn)磷脂酶D的基因工程菌在sdLDL?C檢測(cè)試劑盒開(kāi)發(fā)中的應(yīng)用。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于:本發(fā)明構(gòu)建的產(chǎn)磷脂酶D的基因工程菌能夠高效表達(dá)PLD蛋白,水解酶活達(dá)115.2U/mL,且實(shí)現(xiàn)了其對(duì)現(xiàn)有sdLDL?C檢測(cè)試劑盒中PLD的替代,大大降低相應(yīng)試劑盒的生產(chǎn)成本。 |
