一對(duì)高效編輯水稻W(wǎng)AXY基因的TALEN其識(shí)別打靶位點(diǎn)及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201410412179.1 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN105367628B 公開(公告)日 2019-07-26
申請(qǐng)公布號(hào) CN105367628B 申請(qǐng)公布日 2019-07-26
分類號(hào) C07K14/00(2006.01)I; C12N15/11(2006.01)I; C12N9/22(2006.01)I; C12N15/55(2006.01)I; C12N5/04(2006.01)I; A01H5/00(2018.01)I; A01H6/46(2018.01)I 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 王磊; 許奇武; 原輝; 劉遠(yuǎn)紅 申請(qǐng)(專利權(quán))人 深圳華大基因農(nóng)業(yè)控股有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海一平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 崔佳佳;馬莉華
地址 518120 廣東省深圳市大鵬新區(qū)大鵬街道鵬飛路7號(hào)A205
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一對(duì)高效編輯水稻W(wǎng)AXY基因的TALEN其識(shí)別打靶位點(diǎn)及其應(yīng)用。具體地,本發(fā)明提供了一種可以對(duì)水稻內(nèi)源的WAXY基因高效打靶的轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)因子核酸酶(TALEN)基因的,以及用含有該基因的重組質(zhì)粒進(jìn)行定向打靶的方法。本發(fā)明提供的轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)因子核酸酶含有一對(duì)轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)因子(TALEs)蛋白及分別與其融合的DNA內(nèi)切酶的催化亞基,具有分別識(shí)別并切割水稻內(nèi)源的WAXY基因上的兩個(gè)相鄰位點(diǎn)的功能。在對(duì)TALEs的氨基酸序列進(jìn)行設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)上,合成了編碼該TALEN的核苷酸序列及構(gòu)建了包含該核苷酸序列的載體,通過用TALENs質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞,可以大大地提高細(xì)胞打靶的效率。