一種人ATP7b基因外顯子PCR擴增系統(tǒng)、檢測試劑盒及其應用的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810619125.0 申請日 -
公開（公告）號 CN108841929B 公開（公告）日 2022-03-11
申請公布號 CN108841929B 申請公布日 2022-03-11
分類號 C12Q1/6858（2018.01）I;C12Q1/6883（2018.01）I;CN 104830966 A,2015.08.12;CN 106011302 A,2016.10.12 楊華榮.肝豆狀核變性的遺傳學研究.《中國優(yōu)秀碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 醫(yī)藥衛(wèi)生科技輯》.2012,E070-46.;陳冬梅.Wilson病患兒ATP7B基因外顯子突變研究.《中國優(yōu)秀碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 醫(yī)藥衛(wèi)生科技輯》.2010,E070-11.;Slavka Vrabelova等.Mutation analysis of the ATP7B gene and genotype/phenotype correlation in 227 patients with Wilson disease.《Molecular Genetics and Metabolism》.2005,第86卷（第2005期）,第277–285頁. 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 彭朝敏;金云舟;周巍;陳林;李明陽;鄧淑燕 申請（專利權(quán)）人 上海五色石醫(yī)學技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 上海上谷知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 蔡繼清
地址 201407 上海市奉賢區(qū)沿錢公路5599號21942室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于人核酸體外檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體為人ATP7b基因的PCR擴增檢測系統(tǒng)及其應用。PCR擴增檢測系統(tǒng)包括：引物組、PCR反應母液容器及Sanger Sequencing后的序列分析；引物組容器包含引物SEQ ID No.1～SEQ ID No.42貯存液。本發(fā)明在DNA提取情況后（DNA質(zhì)量滿足要求：1.6≤OD260/OD280≤2.0，DNA最低濃度≥10.0ng/μL），通過PCR反應對人ATP7b基因21個外顯子目的片段同時擴增，通過目的片段的瓊脂糖凝膠電泳進行ATP7b基因外顯子有無缺失突變的判斷，進而進行電泳凝膠DNA的回收純化進行一代測序，通過測序片段的基因序列與Reference Sequence（權(quán)威數(shù)據(jù)庫中參考序列）進行比對，最終進行目標序列中有無單堿基突變的判斷，以期對人ATP7b基因全部外顯子進行金標準方法探討分析肝豆狀核變性在分子遺傳水平上的發(fā)病原因。而且，本方法操作簡單，使用儀器設備普及度很高，適合推廣使用。