基于7-羥基香豆素的定點(diǎn)熒光標(biāo)記方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201510957190.0 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN105541962B | 公開(kāi)（公告）日 | 2021-04-02 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN105541962B | 申請(qǐng)公布日 | 2021-04-02 |
| 分類號(hào) | C07K1/13(2006.01)I | 分類 | 有機(jī)化學(xué)〔2〕; |
| 發(fā)明人 | 張貫京;陳興明;張少鵬;高偉明;李慧玲;潘延超 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 深圳市貝沃德克生物技術(shù)研究院有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | - | 代理人 | - |
| 地址 | 518063廣東省深圳市前海深港合作區(qū)前灣一路1號(hào)A棟201室（入駐深圳市前海商務(wù)秘書有限公司） | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開(kāi)了一種基于7?羥基香豆素的定點(diǎn)熒光標(biāo)記方法，通過(guò)合成M.Barkeri物種的吡咯賴氨酸氨酰?tRNA合成酶(PylRS)的DNA序列，并將所述DNA序列連接到pBK質(zhì)粒上；通過(guò)采用“飽和突變”的方法，構(gòu)建了能夠在原核和真核生物細(xì)胞中表達(dá)的M.Barkeri物種的吡咯賴氨酸氨酰?tRNA合成酶突變庫(kù)Lib?CouKRS；通過(guò)合成用于定點(diǎn)熒光標(biāo)記的7?羥基香豆素賴氨酸，進(jìn)行篩選和驗(yàn)證。本發(fā)明基于7?羥基香豆素的定點(diǎn)熒光標(biāo)記方法達(dá)到了基于7?羥基香豆素在真核生物(哺乳動(dòng)物細(xì)胞)中實(shí)現(xiàn)目的蛋白質(zhì)的氨基酸序列的任意位點(diǎn)的熒光標(biāo)記。?? |
