利用原生質體轉化構建黑根霉CPR基因工程菌的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310316876.2 申請日 -
公開(公告)號 CN103695455B 公開(公告)日 2016-04-13
申請公布號 CN103695455B 申請公布日 2016-04-13
分類號 C12N15/80(2006.01)I;C12N1/15(2006.01)I;C12N1/14(2006.01)I;C12R1/845(2006.01)N 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳小龍;顧光志;朱廷恒;嘉曉勤;范永仙;沈寅初 申請(專利權)人 臺州仙琚藥業(yè)有限公司
代理機構 杭州天正專利事務所有限公司 代理人 浙江工業(yè)大學;臺州仙琚藥業(yè)有限公司
地址 310014 浙江省杭州市下城區(qū)潮王路18號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種利用原生質體轉化技術對黑根霉(Rhizopus?nigericans)進行外源基因的遺傳轉化方法:利用真菌細胞壁降解酶對黑根霉(Rhizopus?nigericans)的細胞壁進行處理,得到原生質體并進行純化,以潮霉素B作為選擇標記,首次將來自米根霉NADPH-細胞色素P450還原酶CYPOR(縮寫:CPR基因)基因采用原生質體轉化方法導入黑根霉中,獲得工程菌。本發(fā)明的有益效果體現在:可以用于黑根霉的分子生物學研究,如研究該菌P450酶系基因對甾體化合物羥化作用的分子機制等;可以用來對黑根霉實施基因工程從而進行遺傳改良育種,提高黑根霉對甾體底物羥化轉化率。