一種羊肚菌原生質(zhì)體的高效制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201610165040.0 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN105647820A 公開（公告）日 2016-06-08
申請(qǐng)公布號(hào) CN105647820A 申請(qǐng)公布日 2016-06-08
分類號(hào) C12N1/14(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 譚俊呈;黃建星;蘭健勇;陳振坤;易弋 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 廣西生眾生物科技開發(fā)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 柳州市榮久專利商標(biāo)事務(wù)所（普通合伙） 代理人 廣西生眾生物科技開發(fā)有限公司
地址 545006 廣西壯族自治區(qū)柳州市高新一路15號(hào)信息產(chǎn)業(yè)園A棟A4-14號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種食用菌原生質(zhì)體的高效制備方法，包括以下步驟：⑴收集新鮮羊肚菌孢子后置于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，液體培養(yǎng)基是在常規(guī)PD培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加CuCl2；⑵培養(yǎng)4-6天后，離心收集菌體，再使用PBS緩沖液重懸菌體；⑶將重懸后的菌體與石英砂混合后，振蕩；⑷將震蕩后的菌體過濾2次；⑸收集過濾液離心處理，菌體用PBS緩沖液洗滌2次后，再重懸于PBS緩沖液中；⑹向重懸液中添加溶壁酶、蝸牛酶，30℃處理1-3h；⑺將酶處理后的細(xì)胞于離心處理，沉淀經(jīng)ZnCl2溶液洗滌后，重懸于ZnCl2溶液中，獲得羊肚菌原生質(zhì)體溶液。該方法通過先制備單細(xì)胞懸液，然后酶解制備原生質(zhì)體，在此過程中通過添加金屬離子控制菌絲生長(zhǎng)和穩(wěn)定原生質(zhì)體，有效的提高了原生質(zhì)體的制備效率。