一種重組貓干擾素的制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202110158299.3 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN112695053A 公開（公告）日 2021-04-23
申請(qǐng)公布號(hào) CN112695053A 申請(qǐng)公布日 2021-04-23
分類號(hào) C12N15/70;C12N15/20;C12P21/02;C07K14/555;C07K1/14;C07K1/22;C07K1/34;C07K1/36 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 崔旻;劉皓軒 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 武漢康湃特生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 武漢智嘉聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 徐紹新
地址 430070 湖北省武漢市洪山區(qū)獅子山街1號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種重組貓干擾素的制備方法，該方法通過優(yōu)化貓ω干擾素的序列以及去除原有信號(hào)肽，構(gòu)建原核表達(dá)重組質(zhì)粒。經(jīng)過培養(yǎng)攜帶該重組質(zhì)粒的大腸桿菌獲得種子液，接種菌液然后經(jīng)低溫誘導(dǎo)獲得發(fā)酵菌液，經(jīng)離心，破碎，收獲上清可溶性蛋白，最后經(jīng)過鎳柱親和層析和透析超濾獲得貓干擾素。該方法的優(yōu)勢在于根據(jù)大腸桿菌密碼子偏好進(jìn)行序列優(yōu)化，同時(shí)去除原核表達(dá)中不需要的信號(hào)肽以及采用低溫誘導(dǎo)，提高了原本在包涵體中表達(dá)的蛋白的可溶性，進(jìn)一步簡化了純化工藝并提高了蛋白活性。