重癥肌無力外周血單細胞轉(zhuǎn)錄組文庫及制備方法和應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110881937.4 申請日 -
公開（公告）號 CN113373523B 公開（公告）日 2022-06-28
申請公布號 CN113373523B 申請公布日 2022-06-28
分類號 C12N15/10（2006.01）I;C12Q1/6806（2018.01）I;C12Q1/6869（2018.01）I;C40B50/06（2006.01）I 分類 組合技術〔8〕;
發(fā)明人 徐立群;金宛霖;羅朝輝;楊歡 申請（專利權(quán)）人 中南大學湘雅醫(yī)院
代理機構(gòu) 成都初陽知識產(chǎn)權(quán)代理事務所（特殊普通合伙） 代理人 -
地址 410008湖南省長沙市湘雅路87號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術領域，具體涉及重癥肌無力外周血單細胞轉(zhuǎn)錄組文庫及制備方法和應用，該方法包括如下步驟：將外周血離心后去除上層清夜得到第一血液標本，向第一血液標本內(nèi)加入等體積的1×PBS，利用巴氏管吹打均勻后得到第二血液標本，向第一離心管中加入人淋巴細胞分離液，傾斜第一離心管并向其中加入第二血液標本，第一離心管放入離心機上進行離心，吸取第一離心管內(nèi)的白霧層PBMC后轉(zhuǎn)移至第二離心管內(nèi)，用1×PBS洗滌后再離心，向第二離心管中加入HBSS重懸細胞，混合均勻得到第三血液樣本，用40μm的細胞過濾器對第三血液樣本進行過濾，用Single Cell 5’技術處理經(jīng)S7過濾后的PBMC，然后利用illumina測序平臺上機得到單細胞轉(zhuǎn)錄組文庫。