一種篩選酶切適配融合蛋白的方法及IGF-I制備方法
基本信息
| 申請?zhí)?/td> | CN202010952359.4 | 申請日 | - |
| 公開（公告）號 | CN112111504A | 公開（公告）日 | 2020-12-22 |
| 申請公布號 | CN112111504A | 申請公布日 | 2020-12-22 |
| 分類號 | C12N15/62(2006.01)I | 分類 | 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 湯華東;李冠霖;柳余莉;歐陽聰;楊薇;高思偲;尹領(lǐng)鵬;謝倩;楊琴霞;張盼盼 | 申請（專利權(quán)）人 | 武漢海特生物制藥股份有限公司 |
| 代理機構(gòu) | 北京匯澤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 徐瑛 |
| 地址 | 430056湖北省武漢市經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)海特科技園（珠山湖大道66號） | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種篩選酶切適配融合蛋白的方法及IGF?I制備方法，該篩選方法是將目標蛋白序列編碼基因分別插入到多個不同的含蛋白酶酶切位點的表達載體中，獲得多個不同融合蛋白的氨基酸序列；所得融合蛋白的氨基酸序列進行二級結(jié)構(gòu)預測；將不同融合蛋白氨基酸序列及其對應的二級結(jié)構(gòu)預測結(jié)果作為輸入文件，預測三維結(jié)構(gòu)；三維結(jié)構(gòu)預測結(jié)果與該融合蛋白相對應的蛋白酶采用Cluspro算法進行分子對接，選擇對接結(jié)果正確比例超過閾值的酶切體系進行實驗驗證，篩選出蛋白酶最適配的融合蛋白。通過上述方法篩選出適用于IGF?I的凝血酶和HRV 3C蛋白酶可溶表達體系，具有穩(wěn)定、可溶、高活性大量表達、酶切方便等優(yōu)點。?? |
