一種一次分離多個已知序列DNA片段的未知側(cè)翼序列的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811171982.5 申請日 -
公開（公告）號 CN109295162B 公開（公告）日 2022-05-27
申請公布號 CN109295162B 申請公布日 2022-05-27
分類號 C12Q1/6806（2018.01）I;C12Q1/6869（2018.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 常玉曉;劉可;趙勝;張會;汪泉 申請（專利權(quán)）人 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院深圳農(nóng)業(yè)基因組研究所（嶺南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué)與技術(shù)廣東省實驗室深圳分中心）
代理機構(gòu) 北京華仲龍騰專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 -
地址 518120廣東省深圳市大鵬新區(qū)鵬飛路7號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種一次分離多個已知序列DNA片段的未知側(cè)翼序列的方法。該方法巧妙利用了Tn5轉(zhuǎn)座酶復(fù)合體可以在打斷DNA的同時，將DNA接頭連接到打斷的DNA片段上的特性，理論上，基因組DNA只要能夠被打斷，其斷點處都會被連接上DNA接頭，連接DNA接頭的效率近乎100%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于反向PCR、接頭PCR、TAIL?PCR等同類技術(shù)，結(jié)合第二代高通量測序技術(shù)，可以同時分離一個樣品中多個已知序列DNA片段的側(cè)翼序列，而且可以從其左右兩側(cè)同時進(jìn)行。對同一個已知序列DNA片段，同時從左右兩端分離其側(cè)翼序列，可以提高側(cè)翼序列的分離效率，如果能夠同時分離到其左右兩側(cè)的側(cè)翼序列，它們可以互相驗證，提高準(zhǔn)確度。