一種可檢測(cè)熱原的單克隆細(xì)胞系的制備方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201810317034.1 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN108707626B | 公開（公告）日 | 2021-10-01 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN108707626B | 申請(qǐng)公布日 | 2021-10-01 |
| 分類號(hào) | C12N15/867（2006.01）I;C12Q1/02（2006.01）I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 方敏;李凱莉;王滔;徐赫男;姜威;李晶;劉文軍;段學(xué)鋒 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院湖州營(yíng)養(yǎng)與健康產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新中心 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京律和信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） | 代理人 | 武玉琴;劉國(guó)偉 |
| 地址 | 100101北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào) | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種可檢測(cè)熱原的單克隆細(xì)胞系的制備方法。該方法主要通過慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系的方式，使得在NF?κB反應(yīng)元件或者IFN?β啟動(dòng)子控制下的熒光素酶基因穩(wěn)定表達(dá)在人上皮細(xì)胞A549細(xì)胞中，然后通過流式篩選得到單克隆，進(jìn)一步篩選對(duì)LPS有反應(yīng)的陽(yáng)性克隆子，最后使用細(xì)菌內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品刺激并同時(shí)和鱟試劑進(jìn)行比較，從而建立了一種新的使用上皮細(xì)胞系檢測(cè)熱原的方法。所述的上皮細(xì)胞系檢測(cè)熱原的方法不需要使用動(dòng)物就能夠真實(shí)地模擬人體對(duì)熱原的反應(yīng)，并且能夠?qū)Φ姆植挤秶鷺O為廣泛的LPS有較強(qiáng)的反應(yīng)，靈敏度高，穩(wěn)定性好，而且A549細(xì)胞市售易得使該熱原檢測(cè)方法簡(jiǎn)單易行。 |
