能應(yīng)用于互作蛋白篩選的在植物細(xì)胞中完整表達(dá)的改造的DH5α BirA基因及其構(gòu)建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610890716.2 申請日 -
公開（公告）號(hào) CN106480071A 公開（公告）日 2017-03-08
申請公布號(hào) CN106480071A 申請公布日 2017-03-08
分類號(hào) C12N15/52(2006.01)I;C12N15/82(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李洪清;林秋鵬;趙波 申請（專利權(quán)）人 中佳源物種（深圳）生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京市立方律師事務(wù)所 代理人 華南師范大學(xué)
地址 510631 廣東省廣州市中山大道西55號(hào)華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開一種能在植物細(xì)胞中完整表達(dá)的改造的DH5αBirA基因，所述改造的DH5αBirA基因與野生的DH5αBirA基因的差異在于第118位氨基酸(由R變成G)，以及剪接識(shí)別位點(diǎn)的AG區(qū)域。還公開一種重組真核表達(dá)載體，其包含如前所述的改造的DH5αBirA基因。還公開一種如前所述的重組真核表達(dá)載體的構(gòu)建方法，其包括以下步驟：獲得野生的DH5αBirA基因；對所述野生的DH5αBirA基因的第352位堿基的突變，以及對可變剪接的剪切位點(diǎn)進(jìn)行點(diǎn)突變，以獲得能完整表達(dá)的改造的DH5αBirA基因，命名為BirAG基因。所述改造的BirAG基因及其構(gòu)建方法為檢測蛋白質(zhì)相互作用技術(shù)實(shí)現(xiàn)條件。本發(fā)明改造的BirAG基因能在植物細(xì)胞中完整表達(dá)，與目的基因融合后在植物中表達(dá)可以生物素化與目的基因互作的植物蛋白。本發(fā)明是一種有效的篩選植物互作蛋白的方法。