能應(yīng)用于互作蛋白篩選的在植物細胞中完整表達的改造的DH5α BirA基因及其構(gòu)建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610890716.2 申請日 -
公開（公告）號 CN106480071B 公開（公告）日 2019-11-12
申請公布號 CN106480071B 申請公布日 2019-11-12
分類號 C12N15/52（2006.01）I; C12N15/82（2006.01）I; C12Q1/6895（2018.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李洪清; 林秋鵬; 趙波 申請（專利權(quán)）人 中佳源物種（深圳）生物科技有限公司
代理機構(gòu) 北京市立方律師事務(wù)所 代理人 華南師范大學(xué)
地址 510631 廣東省廣州市中山大道西55號華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開一種能在植物細胞中完整表達的改造的DH5αBirA基因，所述改造的DH5αBirA基因與野生的DH5αBirA基因的差異在于第118位氨基酸(由R變成G)，以及剪接識別位點的AG區(qū)域。還公開一種重組真核表達載體，其包含如前所述的改造的DH5αBirA基因。還公開一種如前所述的重組真核表達載體的構(gòu)建方法，其包括以下步驟：獲得野生的DH5αBirA基因；對所述野生的DH5αBirA基因的第352位堿基的突變，以及對可變剪接的剪切位點進行點突變，以獲得能完整表達的改造的DH5αBirA基因，命名為BirAG基因。所述改造的BirAG基因及其構(gòu)建方法為檢測蛋白質(zhì)相互作用技術(shù)實現(xiàn)條件。本發(fā)明改造的BirAG基因能在植物細胞中完整表達，與目的基因融合后在植物中表達可以生物素化與目的基因互作的植物蛋白。本發(fā)明是一種有效的篩選植物互作蛋白的方法。