HLA-A0201限制性抗CEA抗原特異性CTL的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201210231576.X 申請日 -
公開（公告）號 CN102719400B 公開（公告）日 2014-04-09
申請公布號 CN102719400B 申請公布日 2014-04-09
分類號 C12N5/0783(2010.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 時宏珍 申請（專利權(quán)）人 江蘇得康生物科技有限公司
代理機構(gòu) 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 代理人 徐冬濤;傅婷婷
地址 211100 江蘇省南京市江寧區(qū)將軍路10號翠屏清華園58幢201室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了HLA-A0201限制性抗CEA抗原特異性CTL的制備方法。該方法通過單采收集外周單個核細胞，富集、純化CD8+T淋巴細胞；用負(fù)載HLA-A0201限制性CEA抗原多肽的成熟樹突狀細胞刺激CD8+T淋巴細胞，并用rhIL-2和rhIL-7聯(lián)合促進T細胞生長；采用Tetramer標(biāo)記方法和流式細胞分選術(shù)純化目標(biāo)CTL；采用固相包被的抗人CD3單抗和IL-2刺激目標(biāo)CTL的生長；加入γ射線輻照后的自體PBMC增強目標(biāo)CTL的活化；加入rhIL-15培育擴增，收集鑒定。本方法制備的目標(biāo)CTL具備高純度，高增殖能力，高殺傷活性，高比例CTL-CM，可用于腫瘤等免疫治療。