HLA-A0201限制性抗CEA抗原特異性CTL的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201210231576.X 申請日 -
公開(公告)號 CN102719400A 公開(公告)日 2012-10-10
申請公布號 CN102719400A 申請公布日 2012-10-10
分類號 C12N5/0783(2010.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 時宏珍 申請(專利權(quán))人 江蘇得康生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 代理人 徐冬濤;傅婷婷
地址 211100 江蘇省南京市江寧區(qū)將軍路10號翠屏清華園58幢201室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了HLA-A0201限制性抗CEA抗原特異性CTL的制備方法。該方法通過單采收集外周單個核細(xì)胞,富集、純化CD8+T淋巴細(xì)胞;用負(fù)載HLA-A0201限制性CEA抗原多肽的成熟樹突狀細(xì)胞刺激CD8+T淋巴細(xì)胞,并用rhIL-2和rhIL-7聯(lián)合促進(jìn)T細(xì)胞生長;采用Tetramer標(biāo)記方法和流式細(xì)胞分選術(shù)純化目標(biāo)CTL;采用固相包被的抗人CD3單抗和IL-2刺激目標(biāo)CTL的生長;加入γ射線輻照后的自體PBMC增強(qiáng)目標(biāo)CTL的活化;加入rhIL-15培育擴(kuò)增,收集鑒定。本方法制備的目標(biāo)CTL具備高純度,高增殖能力,高殺傷活性,高比例CTL-CM,可用于腫瘤等免疫治療。