一種從微量脂肪中高效獲得脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的方法
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN202110812090.4 | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN113416694A | 公開(公告)日 | 2021-09-21 |
申請公布號 | CN113416694A | 申請公布日 | 2021-09-21 |
分類號 | C12N5/0775(2010.01)I | 分類 | 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 焦陽;張勇;王鐵;朱迪·德瓦庫瑪;楊麗華;李靖 | 申請(專利權(quán))人 | 江蘇瑞思坦生物科技有限公司 |
代理機(jī)構(gòu) | 無錫睿升知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) | 代理人 | 張悅 |
地址 | 215000江蘇省蘇州市吳中區(qū)經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)越溪街道吳中大道2588號5幢521室、523室、428室 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明涉及一種從微量脂肪中高效獲得脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的方法,包括以下步驟:微量脂肪采集;原代制備脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞;洗滌脂肪組織;使用不同的消化酶對脂肪組織進(jìn)行兩步消化;將消化后的細(xì)胞離心;加入完全培養(yǎng)基,重懸細(xì)胞沉淀,之后接種至包被好的培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng);脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的傳代;潤洗培養(yǎng)之后的脂肪細(xì)胞;加入胰蛋白酶消化脂肪細(xì)胞,至脂肪細(xì)胞在顯微鏡下由梭性貼壁狀變?yōu)閳A形脫壁狀態(tài),加入DMEM終止消化;之后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管中離心;將離心管底部的細(xì)胞加入完全培養(yǎng)基,重懸細(xì)胞沉淀,接種至培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng);傳代培養(yǎng)細(xì)胞。本發(fā)明使用的脂肪量極少,同時不影響細(xì)胞的最終得率。 |
