一種自殺他殺式質(zhì)粒、利用其的釀酒酵母無(wú)痕基因編輯方法及應(yīng)用
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202010456216.4 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN111471720A | 公開（公告）日 | 2020-07-31 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN111471720A | 申請(qǐng)公布日 | 2020-07-31 |
| 分類號(hào) | C12N15/90(2006.01)I | 分類 | - |
| 發(fā)明人 | 朱佑民;陶小倩;程倩;王梓旭;邢妍婧;趙一凡;柳偉強(qiáng);楊平 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 蘇州泓迅生物科技股份有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京品源專利代理有限公司 | 代理人 | 蘇州泓迅生物科技股份有限公司 |
| 地址 | 215123江蘇省蘇州市蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號(hào)生物納米園C20棟 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明提供一種自殺他殺式質(zhì)粒、利用其的釀酒酵母無(wú)痕基因編輯方法及應(yīng)用。所述自殺他殺式質(zhì)粒包括復(fù)制起點(diǎn)、篩選標(biāo)記、Cas9蛋白表達(dá)框和sgRNA1表達(dá)框；所述sgRNA1表達(dá)框包含啟動(dòng)子、針對(duì)基因編輯載體和所述自殺他殺式質(zhì)粒的共同序列設(shè)計(jì)的sgRNA1、scaffold和終止序列。將基因編輯載體轉(zhuǎn)入釀酒酵母中，再轉(zhuǎn)入所述自殺他殺式質(zhì)粒，即可得到無(wú)痕編輯后的釀酒酵母菌株。利用所述自殺他殺式質(zhì)粒編輯釀酒酵母，既不影響基因編輯后對(duì)成功轉(zhuǎn)化基因編輯質(zhì)粒的菌株進(jìn)行選擇，又顯著提高了消除質(zhì)粒成功率；同時(shí)，經(jīng)過兩輪質(zhì)粒轉(zhuǎn)化即可達(dá)到無(wú)痕編輯的效果，進(jìn)一步加快了釀酒酵母無(wú)痕編輯的速率。?? |
