一種超大質粒的體外組裝方法及其應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201911382968.4 申請日 -
公開(公告)號 CN110951759A 公開(公告)日 2020-04-03
申請公布號 CN110951759A 申請公布日 2020-04-03
分類號 C12N15/66;C12N15/63 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 朱佑民;楊平;孫健;柳偉強;劉敏祥;嚴成麗;邢妍婧;趙一凡 申請(專利權)人 蘇州泓迅生物科技股份有限公司
代理機構 北京品源專利代理有限公司 代理人 蘇州泓迅生物科技股份有限公司
地址 215123 江蘇省蘇州市蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號生物納米園C20樓101單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種超大質粒的體外組裝方法及其應用,所述方法包括采用組裝片段與線性化組裝載體進行體外組裝的步驟;所述組裝片段的長度不小于1kb;所述組裝片段與所述線性化組裝載體的摩爾比為(2~6):1。本發(fā)明采用每輪片段數(shù)量逐級遞減的方式,在體外經(jīng)過多輪組裝構建超大質粒,解決了體外組裝超大質粒成功率低的問題,同時避免了酵母體內(nèi)組裝時酵母菌生長緩慢、酵母中抽提質粒質量差的問題,成功率高,經(jīng)過多輪重組后便可獲得超大質粒,加快了超大質粒合成速率。