一種質(zhì)粒構(gòu)建試劑盒、質(zhì)粒構(gòu)建方法及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201911380365.0 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN110982834A 公開（公告）日 2020-04-10
申請(qǐng)公布號(hào) CN110982834A 申請(qǐng)公布日 2020-04-10
分類號(hào) C12N15/70;C12N15/64 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 朱佑民;楊平;孫健;柳偉強(qiáng);劉敏祥;嚴(yán)成麗;邢妍婧;趙一凡 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 蘇州泓迅生物科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京品源專利代理有限公司 代理人 蘇州泓迅生物科技股份有限公司
地址 215123 江蘇省蘇州市蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號(hào)生物納米園C20樓101單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種質(zhì)粒構(gòu)建試劑盒、質(zhì)粒構(gòu)建方法及其應(yīng)用，所述試劑盒包括待組裝的DNA片段Fn和載體；所述載體包括中間載體和/或組裝載體；所述試劑盒還包括大腸桿菌，所述大腸桿菌含有λ噬菌體Red重組系統(tǒng)的質(zhì)粒。本發(fā)明采用體外組裝和體內(nèi)組裝相結(jié)合的方式，首先采用重組酶體系將大片段DNA與組裝載體在體外進(jìn)行組裝，再將體外組裝產(chǎn)物轉(zhuǎn)化入含有λ噬菌體Red重組系統(tǒng)質(zhì)粒的大腸桿菌中進(jìn)行體內(nèi)組裝，構(gòu)建的試劑盒結(jié)合了體外組裝和體內(nèi)組裝的優(yōu)點(diǎn)，并采用λ噬菌體Red重組系統(tǒng)增強(qiáng)大腸桿菌的體內(nèi)組裝能力，加快了質(zhì)粒合成速率，顯著提高了質(zhì)粒的合成成功率。