一種雙sgRNA無(wú)痕基因編輯質(zhì)粒及其制備方法和應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010525391.4 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN111621512A 公開(kāi)(公告)日 2020-09-04
申請(qǐng)公布號(hào) CN111621512A 申請(qǐng)公布日 2020-09-04
分類(lèi)號(hào) C12N15/81(2006.01)I 分類(lèi) 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 朱佑民;程倩;王梓旭;陶小倩;楊平;柳偉強(qiáng);邢妍婧;趙一凡 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 蘇州泓迅生物科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京品源專(zhuān)利代理有限公司 代理人 蘇州泓迅生物科技股份有限公司
地址 215123江蘇省蘇州市蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號(hào)生物納米園C20棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種雙sgRNA無(wú)痕基因編輯質(zhì)粒及其制備方法和應(yīng)用,所述質(zhì)粒包括Cas9蛋白表達(dá)框和雙sgRNA表達(dá)框;所述雙sgRNA包括宿主基因編輯sgRNA和質(zhì)?;蚓庉媠gRNA。本發(fā)明設(shè)計(jì)含有雙sgRNA的質(zhì)粒對(duì)宿主進(jìn)行基因編輯,所述雙sgRNA的其中一條sgRNA用于對(duì)宿主進(jìn)行基因編輯,另一條sgRNA用于消除質(zhì)粒,實(shí)現(xiàn)了在對(duì)宿主進(jìn)行基因編輯的同時(shí)消除基因編輯質(zhì)粒的目的,不會(huì)因Cas9蛋白的持續(xù)表達(dá)而提高脫靶率,也不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn),將該質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入釀酒酵母進(jìn)行基因編輯,顯著提高了釀酒酵母無(wú)痕編輯的效率。??