一種培養(yǎng)HEK-293T細(xì)胞株高效分泌表達(dá)豬瘟E2蛋白的方法及應(yīng)用
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201811419636.4 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN109468268B | 公開(kāi)（公告）日 | 2019-03-15 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN109468268B | 申請(qǐng)公布日 | 2019-03-15 |
| 分類號(hào) | C12N5/073(2010.01)I | 分類 | - |
| 發(fā)明人 | 顏仁和;王升堯;李紅衛(wèi);高永新;李安迪;萬(wàn)鵬飛 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 廣州伯尼茲生物科技有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 | 代理人 | 胡輝;舒勝英 |
| 地址 | 510663廣東省廣州市高新技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)科學(xué)城攬?jiān)侣?號(hào)廣州國(guó)際企業(yè)孵化器F區(qū)F521 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開(kāi)了一種培養(yǎng)HEK?293T細(xì)胞株高效分泌表達(dá)豬瘟E2蛋白的方法，該方法為細(xì)胞生物反應(yīng)器加入含血清培養(yǎng)基，再接種HEK?293T細(xì)胞，將培養(yǎng)基先低速循環(huán)、再高速循環(huán)后檢測(cè)葡萄糖濃度；每隔22?26h檢測(cè)細(xì)胞耗糖，當(dāng)殘?zhí)堑陀?g/L時(shí)，添加葡萄糖至3.8～4.2g/L；當(dāng)每天糖耗超過(guò)1.5g/L時(shí)，去除培養(yǎng)基，加入無(wú)血清培養(yǎng)基；根據(jù)細(xì)胞耗糖量，補(bǔ)加葡萄糖；每隔4?5天收集部分體積，并補(bǔ)回新的無(wú)血清培養(yǎng)基。本發(fā)明通過(guò)優(yōu)化各個(gè)參數(shù)，一次實(shí)驗(yàn)最多可以收集15批次表達(dá)蛋白，產(chǎn)能高。且培養(yǎng)條件穩(wěn)定，重復(fù)性高。本發(fā)明方法使得培養(yǎng)的細(xì)胞密度高，表達(dá)量高。單位疫苗制作成本低，性價(jià)比高，應(yīng)用前景大。?? |
