大片段基因組的捕獲探針的制備方法及試劑盒

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810403576.0 申請日 -
公開（公告）號 CN108676847A 公開（公告）日 2018-10-19
申請公布號 CN108676847A 申請公布日 2018-10-19
分類號 C12Q1/6811 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 楊吉元;楊驍 申請（專利權(quán)）人 深圳人體密碼基因科技有限公司
代理機構(gòu) 深圳舍穆專利代理事務(wù)所（特殊普通合伙） 代理人 深圳人體密碼基因科技有限公司;上海何因生物科技有限公司
地址 518057 廣東省深圳市南山區(qū)粵海街道科技園瓊宇路特發(fā)信息科技大廈8樓8B
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種大片段區(qū)域基因組的捕獲探針的制備方法，其包括：設(shè)計PCR引物對待捕獲基因組進行PCR反應(yīng)擴增；將在PCR反應(yīng)中所產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物混合成混合物，并將混合物破碎成規(guī)定片段；在規(guī)定片段的兩端接上含有RNA聚合酶識別序列的接頭，構(gòu)建成文庫；使用RNA聚合酶將所得到的文庫中的片段轉(zhuǎn)錄成RNA產(chǎn)物；加入DNA消化酶，將RNA產(chǎn)物中的DNA鏈消化；并且消化后的產(chǎn)物經(jīng)純化處理，得到捕獲的基因探針。在本發(fā)明中，采用將待捕獲區(qū)域基因的擴增產(chǎn)物破碎成規(guī)定片段，經(jīng)過后續(xù)反應(yīng)得到適合長度的基因探針(RNA探針)。這個長度范圍的RNA不易自我退火形成二級結(jié)構(gòu)，使用探針時結(jié)合效率較高。由此，能夠在確保特異性的同時具有更好的容錯性，實現(xiàn)了更高的靈敏度。