一種單管實現(xiàn)連續(xù)區(qū)域的非特異性PCR擴增方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910075840.7 申請日 -
公開（公告）號 CN110029147A 公開（公告）日 2019-07-19
申請公布號 CN110029147A 申請公布日 2019-07-19
分類號 C12Q1/6806;C12Q1/6869 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 楊吉元;劉建全;楊驍;張嘉楠 申請（專利權(quán)）人 深圳人體密碼基因科技有限公司
代理機構(gòu) 北京知呱呱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 上海何因生物科技有限公司;上海優(yōu)甲醫(yī)療科技有限公司;深圳人體密碼基因科技有限公司;石家莊博瑞迪生物技術(shù)有限公司
地址 201602 上海市松江區(qū)佘山鎮(zhèn)陶干路701號5棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明實施例公開了一種單管實現(xiàn)連續(xù)區(qū)域的非特異性PCR擴增方法，其包括根據(jù)靶序列設(shè)計PLMMamp引物，其中所述PLMMamp引物包括模板雜交區(qū)核苷酸序列、靶區(qū)域延伸區(qū)核苷酸序列以及連接所述模板雜交區(qū)核苷酸序列和靶區(qū)延伸區(qū)核苷酸序列的中間鏈接區(qū)核苷酸序列，所述模板雜交區(qū)核苷酸序列位于擴增子核苷酸序列內(nèi)，所述靶區(qū)域延伸區(qū)核苷酸序列位于擴增子核苷酸序列邊界，且所述模板雜交區(qū)核苷酸序列與所述靶區(qū)域延伸區(qū)核苷酸序列無重疊。本發(fā)明中，PLMMamp(Pad?Lock Mediated Mutiplex Amplification)引物可以在單管內(nèi)完成多重PCR捕獲，極大的降低了勞動成本和耗用成本。另外一方面，本發(fā)明的PLMMamp引物由于具有雜交區(qū)和延伸區(qū)雙區(qū)功能，因此，能夠很好的避開重復(fù)區(qū)的非特異性擴增現(xiàn)象，降低非特異性擴增產(chǎn)物。