一種用于消除妊娠紋的間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)上清中細(xì)胞因子凍干粉的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910194327.X 申請日 -
公開(公告)號 CN110075050A 公開(公告)日 2019-08-02
申請公布號 CN110075050A 申請公布日 2019-08-02
分類號 A61K8/98(2006.01)I; A61K8/64(2006.01)I; A61K8/60(2006.01)I; A61K8/34(2006.01)I; A61K8/73(2006.01)I; A61K8/02(2006.01)I; A61Q19/08(2006.01)I; A61K35/28(2015.01)I; A61K38/19(2006.01)I; A61K9/19(2006.01)I; A61K47/26(2006.01)I; A61P17/00(2006.01)I; A61K31/728(2006.01)N 分類 醫(yī)學(xué)或獸醫(yī)學(xué);衛(wèi)生學(xué);
發(fā)明人 徐念沁; 殷勤偉; 徐全成; 陳文均; 胡佳麗 申請(專利權(quán))人 江蘇全能干細(xì)胞生物工程有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京華際知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 張偉
地址 210032 江蘇省南京市浦口區(qū)星火路10號鼎業(yè)百泰大廈B座202-1室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開一種用于消除妊娠紋的間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)上清細(xì)胞因子凍干粉的制備方法,包括以下步驟:制備原代脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞及原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,建立細(xì)胞庫;復(fù)蘇P1代脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞、P1代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,加入生理鹽水,離心,收集細(xì)胞沉淀,接種于無血清培養(yǎng)液中,進(jìn)行鋪板培養(yǎng);鋪板培養(yǎng)4?5天后細(xì)胞密度達(dá)到70%,收集培養(yǎng)上清,加入EDTA重組胰蛋白酶消化細(xì)胞,培養(yǎng)至P5代,收集培養(yǎng)上清;向含P5代細(xì)胞的細(xì)胞工廠中加入生理鹽水,反復(fù)凍融后與收集的P2至P5間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)上清混合,離心去沉淀;添加海藻糖、甘露醇和透明質(zhì)酸,進(jìn)行超低溫抽真空凍干,得到細(xì)胞因子凍干粉。