重組人寡腺苷酸合成酶-1的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201110337751.9 申請日 -
公開（公告）號 CN102358897B 公開（公告）日 2013-02-13
申請公布號 CN102358897B 申請公布日 2013-02-13
分類號 C12N9/12(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 周敏毅;李孜;徐晨;劉金毅;程永慶 申請（專利權）人 北京畢艾歐科技發(fā)展有限責任公司
代理機構 - 代理人 -
地址 102600 北京市大興區(qū)北臧村鎮(zhèn)北京生物工程與醫(yī)藥產業(yè)基地天富大街九號北京三元基因工程有限公司
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領域，涉及重組人寡腺苷酸合成酶-1（OAS1）的制備方法，依次包括步驟：1）化學合成OAS1蛋白基因表達序列；2）構建表達OAS1蛋白的重組工程菌；3）發(fā)酵培養(yǎng)產生包涵體形式表達的OAS1；4）獲得包涵體并對其依次用含從低到高濃度的1-8mol/L的尿素的溶液進行洗滌，含每種濃度的尿素的溶液洗滌1次，共洗滌2-4次后用含6-8mol/L鹽酸胍與同下步陽離子交換層析相同緩沖溶液體系的溶液進行變性處理；5）變性液上陽離子交換層析柱進行純化處理，洗脫后得到純度在95%以上的OAS1變性蛋白。采用該方法可在不添加有利于純化的標簽的情況下通過一步純化原核表達系統(tǒng)表達的OAS1蛋白，使其純度達到95%以上，更好的符合免疫與篩選抗體的需要。