一種表達(dá)苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌制品的制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201110339617.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN102358890B 公開(kāi)（公告）日 2013-07-17
申請(qǐng)公布號(hào) CN102358890B 申請(qǐng)公布日 2013-07-17
分類(lèi)號(hào) C12N1/21(2006.01)I;C12N15/74(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)N 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 周敏毅;牛春;劉金毅;程永慶 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 北京畢艾歐科技發(fā)展有限責(zé)任公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 102600 北京市大興區(qū)北臧村鎮(zhèn)北京生物工程與醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)基地天富大街九號(hào)北京三元基因工程有限公司
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及表達(dá)苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌制品的制備方法，按順序包括如下步驟：1）獲得表達(dá)苯丙氨酸解氨酶的基因；2）將表達(dá)苯丙氨酸解氨酶的基因與適于轉(zhuǎn)化乳酸乳球菌的表達(dá)載體相連接形成重組表達(dá)載體；3）將重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化感受態(tài)的乳酸乳球菌；4）篩選獲得高效表達(dá)苯丙氨酸解氨酶的乳酸乳球菌菌株；5）發(fā)酵乳酸乳球菌并誘導(dǎo)表達(dá)苯丙氨酸解氨酶；6）干燥發(fā)酵收獲的菌體，其中在5）的發(fā)酵時(shí)使用的培養(yǎng)基由體積比4∶6-6∶4的配制中間培養(yǎng)基與M17肉湯培養(yǎng)基混合得到，并將pH值調(diào)節(jié)到6.5-7.5。采用本發(fā)明的技術(shù)方案可使獲得的乳酸乳球菌活菌數(shù)和其中苯丙氨酸解氨酶的比活力大幅提高，其中前者可達(dá)到1012CFU/ml以上，后者可達(dá)到80U/g以上。