一種痰液微生物宏基因組去宿主化提取和建庫方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201711397653.8 申請日 -
公開（公告）號 CN108048450B 公開（公告）日 2021-10-29
申請公布號 CN108048450B 申請公布日 2021-10-29
分類號 C12N15/10（2006.01）I;C12N1/06（2006.01）I;C40B50/06（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 伍泳彰;陳杰 申請（專利權(quán)）人 湖南賽哲智造科技有限公司
代理機構(gòu) 廣州粵高專利商標代理有限公司 代理人 單香杰
地址 410036 湖南省長沙市岳麓區(qū)學(xué)士街道學(xué)士路336號湖南省檢驗檢測特色產(chǎn)業(yè)園A9棟一層、六層、七層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于微生物分子生物學(xué)檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一種痰液微生物宏基因組去宿主化提取方法，包括第一次痰液液化、第二次痰液液化、微生物破壁、DNA提取和核酸質(zhì)量檢測等步驟。本發(fā)明還公開了一種痰液微生物宏基因組建庫方法，包括樣品基因組DNA提取、基因組DNA處理、文庫擴增、文庫初純化、兩步法片段選擇和上機檢測等步驟。本發(fā)明采用胰蛋白酶和SDS聯(lián)合的溫柔型消化法，將宿主基因組釋放于溶液中，獲得保留完整細胞壁結(jié)構(gòu)的微生物，實現(xiàn)去宿主化微生物核酸提取。本發(fā)明所提供的提取方法及建庫方法兼容性好，可廣泛用于主流測序平臺，具有靈活簡便、高效快捷、節(jié)約成本的優(yōu)點，具有較好的推廣應(yīng)用前景。