楸樹內(nèi)生真菌的原生質(zhì)體的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201410016834.1 申請日 -
公開（公告）號 CN103756917B 公開（公告）日 2016-05-04
申請公布號 CN103756917B 申請公布日 2016-05-04
分類號 C12N1/14(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 苗志奇;陳榕華;朱閃爍;于湘莉;唐克軒 申請（專利權(quán)）人 成都上交致遠生物科技有限公司
代理機構(gòu) 上海漢聲知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 上海交通大學;上海交大知識產(chǎn)權(quán)管理有限公司;唐克軒;成都上交致遠生物科技有限公司
地址 200240 上海市閔行區(qū)東川路800號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種楸樹內(nèi)生真菌的原生質(zhì)體的制備方法；所述方法包括以下步驟：步驟1，菌絲體的制備；步驟2，原生質(zhì)體的制備；步驟3，原生質(zhì)體純化；步驟4，原生質(zhì)體再生。本發(fā)明所述方法制備的原生質(zhì)體數(shù)量較多，可達到6×107個/毫克菌絲，獲得的原生質(zhì)體的活力較高，再生率可達到1.2%。本發(fā)明選擇培養(yǎng)12-24h的菌絲體，真菌處于快速生長期，生長快，細胞壁易于酶的裂解，釋放出的原生質(zhì)體的數(shù)量多，不易裂解，活力高。本發(fā)明選取5～30mg/ml?Glucanex復合酶作為細胞壁裂解酶液，裂解效率高，原生質(zhì)體釋放數(shù)量多。本發(fā)明選用KCl或NaCl作為滲透壓穩(wěn)定劑，保證了原生質(zhì)體制備數(shù)量與原生質(zhì)體的穩(wěn)定。