一種FAD為輔基的葡萄糖脫氫酶的高產(chǎn)發(fā)酵方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110955924.7 申請日 -
公開（公告）號 CN113637649A 公開（公告）日 2021-11-12
申請公布號 CN113637649A 申請公布日 2021-11-12
分類號 C12N9/04（2006.01）I;C12N1/16（2006.01）I;C12R1/84（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳文嘉;李因來 申請（專利權(quán)）人 杭州博岳生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 深圳紫晴專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 張歡歡
地址 310018浙江省杭州市錢塘新區(qū)和享科技中心3幢701、702室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種FAD為輔基的葡萄糖脫氫酶的高產(chǎn)發(fā)酵方法，屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域，包括如下步驟：1）取?80℃凍存的表達菌種，無菌操作條件下接種至種子培養(yǎng)基中，種子培養(yǎng)基為BMGY培養(yǎng)基或者為YPD培養(yǎng)基，種子培養(yǎng)使用500ml或者1L三刺三角搖瓶，裝液量250ml～500ml，接種量0.5‰～1.5‰，接種后在搖床中30℃250rpm培養(yǎng)16～24小時至OD600達到6～10；本發(fā)明通過使用重組畢赤酵母菌在10L發(fā)酵罐中培養(yǎng)時經(jīng)過60小時的誘導(dǎo)，培養(yǎng)基上清中表達的葡萄糖脫氫酶酶活達到1150000U/L（DCPIP比色法測定值）,酶活得率提高了4.4～4.5倍，并且誘導(dǎo)時間僅需60小時，比現(xiàn)有技術(shù)所使用的誘導(dǎo)時間縮短了三分之一甚至近一半，解決了現(xiàn)有技術(shù)發(fā)酵時間長、酶活得率低、不利于大規(guī)模工業(yè)化放大生產(chǎn)的問題。