一種用于在昆蟲細胞中表達包含重疊開放閱讀框的基因的表達盒及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202111105263.5 申請日 -
公開（公告）號 CN113897396A 公開（公告）日 2022-01-07
申請公布號 CN113897396A 申請公布日 2022-01-07
分類號 C12N15/866（2006.01）I;C12N7/01（2006.01）I;C12N5/10（2006.01）I;C12R1/93（2006.01）N 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 不公告發(fā)明人 申請（專利權(quán)）人 勁帆生物醫(yī)藥科技（武漢）有限公司
代理機構(gòu) 武漢華之喻知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 彭翠;曹葆青
地址 430223 湖北省武漢市東湖新技術(shù)開發(fā)區(qū)光谷七路128號核磁波譜儀產(chǎn)業(yè)基地實驗樓311-22（自貿(mào)區(qū)武漢片區(qū)）
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種用于在昆蟲細胞中表達包含重疊開放閱讀框的基因的表達盒及其應(yīng)用，該表達盒包含從5’至3’的、可操作連接的：能夠在昆蟲細胞中驅(qū)動轉(zhuǎn)錄的啟動子；人工構(gòu)建序列；僅缺少第一個翻譯起始密碼子的重疊開放閱讀框；其中，人工構(gòu)建序列包含在昆蟲細胞中有剪接活性的天然的或經(jīng)過人工改造的內(nèi)含子，內(nèi)含子中包含ATG，或者內(nèi)含子位于ATG中任意相鄰兩個核苷酸之間。本發(fā)明包含該表達盒的重組腺相關(guān)病毒載體利用設(shè)計的內(nèi)含子序列，通過內(nèi)含子剪接作用，調(diào)控VP1、VP2和VP3蛋白相對表達，以及Rep78和Rep52蛋白的相對表達，可在昆蟲細胞中大規(guī)模生產(chǎn)具有高包裝率和感染性的rAAV。