一種用于在昆蟲(chóng)細(xì)胞中表達(dá)包含重疊開(kāi)放閱讀框的基因的表達(dá)盒及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111105263.5 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN113897396A 公開(kāi)（公告）日 2022-01-07
申請(qǐng)公布號(hào) CN113897396A 申請(qǐng)公布日 2022-01-07
分類(lèi)號(hào) C12N15/866（2006.01）I;C12N7/01（2006.01）I;C12N5/10（2006.01）I;C12R1/93（2006.01）N 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 不公告發(fā)明人 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 勁帆生物醫(yī)藥科技（武漢）有限公司
代理機(jī)構(gòu) 武漢華之喻知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 彭翠;曹葆青
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法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域，公開(kāi)了一種用于在昆蟲(chóng)細(xì)胞中表達(dá)包含重疊開(kāi)放閱讀框的基因的表達(dá)盒及其應(yīng)用，該表達(dá)盒包含從5’至3’的、可操作連接的：能夠在昆蟲(chóng)細(xì)胞中驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)子；人工構(gòu)建序列；僅缺少第一個(gè)翻譯起始密碼子的重疊開(kāi)放閱讀框；其中，人工構(gòu)建序列包含在昆蟲(chóng)細(xì)胞中有剪接活性的天然的或經(jīng)過(guò)人工改造的內(nèi)含子，內(nèi)含子中包含ATG，或者內(nèi)含子位于ATG中任意相鄰兩個(gè)核苷酸之間。本發(fā)明包含該表達(dá)盒的重組腺相關(guān)病毒載體利用設(shè)計(jì)的內(nèi)含子序列，通過(guò)內(nèi)含子剪接作用，調(diào)控VP1、VP2和VP3蛋白相對(duì)表達(dá)，以及Rep78和Rep52蛋白的相對(duì)表達(dá)，可在昆蟲(chóng)細(xì)胞中大規(guī)模生產(chǎn)具有高包裝率和感染性的rAAV。