高效分泌表達豬瘟E2蛋白的CHO細胞株的培養(yǎng)方法及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710687334.4 申請日 -
公開（公告）號 CN107974432B 公開（公告）日 2021-04-23
申請公布號 CN107974432B 申請公布日 2021-04-23
分類號 C12N5/10(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 錢泓;吳有強;卞廣林;吳素芳;車影;查銀河 申請（專利權(quán)）人 浙江海隆生物科技有限公司
代理機構(gòu) 北京乾誠五洲知識產(chǎn)權(quán)代理有限責任公司 代理人 付曉青;李廣文
地址 312000浙江省紹興市濱海新城馬歡路398號科創(chuàng)中心2號樓5樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種高效分泌表達豬瘟E2蛋白的CHO細胞株的培養(yǎng)方法及其應(yīng)用，所述的培養(yǎng)方法包括以下步驟：1)將高效分泌表達豬瘟E2蛋白的CHO細胞株在1號培養(yǎng)基中逐級放大培養(yǎng)；2)將放大培養(yǎng)后的細胞轉(zhuǎn)入生物反應(yīng)器中進行發(fā)酵培養(yǎng)，在2號培養(yǎng)基中進行攪拌培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)初期培養(yǎng)溫度為36.5～37.5℃，pH為7.05～7.25，從發(fā)酵培養(yǎng)的120±2h開始，將培養(yǎng)溫度下調(diào)至31.5～32.5℃，并將pH下調(diào)至6.90～7.10；在整個發(fā)酵培養(yǎng)的過程中，控制溶氧為20％～60％；在生物反應(yīng)器中發(fā)酵的第12天后，收獲細胞發(fā)酵液。本發(fā)明的培養(yǎng)方法獲得的豬瘟E2蛋白產(chǎn)高、且具有更好的可操作性和實用性，因此，本發(fā)明更有利于擴大培養(yǎng)規(guī)模。??