一種ARMS-TaqManBlocker體系的Blocker設(shè)計(jì)和篩選方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202011295178.5 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN112375808A | 公開(kāi)（公告）日 | 2021-02-19 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN112375808A | 申請(qǐng)公布日 | 2021-02-19 |
| 分類(lèi)號(hào) | C12Q1/6811(2018.01)I; | 分類(lèi) | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 楊芳梅;徐紅梅 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 | 合肥歐創(chuàng)基因生物科技有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 合肥律眾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 趙娟 |
| 地址 | 230000安徽省合肥市高新區(qū)創(chuàng)新大道106號(hào)明珠產(chǎn)業(yè)園3#5層D區(qū) | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開(kāi)了一種ARMS?TaqMan Blocker體系的Blocker設(shè)計(jì)和篩選方法，設(shè)計(jì)方法將Blocker設(shè)計(jì)在突變位點(diǎn)處，覆蓋突變位點(diǎn)即可；Blocker與野生型模板完全匹配，完全匹配的Tm值高于ARMS引物與野生型模板匹配的Tm值，允許熔點(diǎn)差低于5℃；Blocker與突變型模板不完全匹配，不完全匹配的Tm值與ARMS引物跟突變型模板的Tm值一致或接近；Blocker的3’末端添加多個(gè)與模板不匹配的無(wú)關(guān)堿基；篩選方法為，按照上述Blocker設(shè)計(jì)原則設(shè)計(jì)3?10條Blocker，使這些Blocker與突變型模板匹配的Tm值在ARMS引物跟突變型模板匹配的Tm值附近呈現(xiàn)逐步升高的梯度，然后經(jīng)實(shí)時(shí)PCR驗(yàn)證梯度Blocker對(duì)體系靈敏度和特異性的影響，篩選出對(duì)靈敏度無(wú)影響且特異性最好的Blocker。本發(fā)明提供的Blocker設(shè)計(jì)和篩選方法降低成本的同時(shí)，提升了體系的特異性。?? |
