一種高通量檢測探針及其熔解曲線檢測方法及其應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910796967.8 申請日 -
公開（公告）號 CN110438124A 公開（公告）日 2019-11-12
申請公布號 CN110438124A 申請公布日 2019-11-12
分類號 C12N15/11（2006.01）I; C12Q1/70（2006.01）I; C12Q1/6858（2018.01）I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 楊芳梅; 盧德景; 徐紅梅 申請（專利權）人 合肥歐創(chuàng)基因生物科技有限公司
代理機構 杭州裕陽聯合專利代理有限公司 代理人 合肥歐創(chuàng)基因生物科技有限公司
地址 230000 安徽省合肥市蜀山區(qū)高新區(qū)創(chuàng)新大道106號明珠產業(yè)園3#5層D區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種高通量檢測探針及其熔解曲線檢測方法及其應用，本發(fā)明的探針在擴增階段形成類似發(fā)卡結構的分子信標探針，該探針利用多個G堿基對探針的熒光進行淬滅，在后續(xù)的熔解程序段，該探針與靶核酸發(fā)生熔解，根據探針的5’尾巴序列的堿基組成或在擴增子下游區(qū)域的延伸長度調節(jié)Tm值，探針可使用多色熒光基團標記，利用多通道從而達到更高通量的檢測目的，單個通道至少檢測8個靶核酸；檢測探針在第一輪擴增時，其靶序列特異性結合序列Ⅰ與靶核酸特異結合，此時靶序列特異性結合序列Ⅱ被酶切，形成第二輪延伸的引物，通過兩次特異性結合，增強了檢測特異性，形成更窄的熔解峰，提高了通道利用效率，也同時提高了檢測靈敏度。