一種使用IMAC層析純化非標簽化CRM197蛋白的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110624063.4 申請日 -
公開（公告）號 CN113402592A 公開（公告）日 2021-09-17
申請公布號 CN113402592A 申請公布日 2021-09-17
分類號 C07K14/34（2006.01）I;C07K1/22（2006.01）I 分類 有機化學〔2〕;
發(fā)明人 魏鑫;侯文禮;黃杰;孫俊;陳邱;李松;賴藝;薛冰;馮曉 申請（專利權）人 成都康華生物制品股份有限公司
代理機構 成都東唐智宏專利代理事務所（普通合伙） 代理人 羅言剛
地址 610000四川省成都市經濟技術開發(fā)區(qū)北京路182號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種使用IMAC層析純化非標簽化CRM197蛋白的方法，包括如下步驟：（1）將大腸桿菌表達系統(tǒng)得到非標簽化的CRM197蛋白包涵體用變性劑處理，（2）過濾后上樣IMAC層析柱，使用洗脫液洗脫，收集洗脫峰，（3）用復性液復性及超濾濃縮，（4）然后進行分子篩層析或疏水層析，獲得CRM197蛋白。本發(fā)明不需要添加His標簽，只需要對蛋白進行變性處理，從而打開蛋白結構使蛋白結構內部的His暴露出來，從而增加與金屬離子的結合能力，然后根據(jù)適當?shù)南疵摬襟E將目的蛋白與雜質分離，該技術方案特別適用于包涵體的純化，一步層析就能得到純度大于90%的樣品。