一種轉(zhuǎn)基因豬篩選標記基因敲除的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201410157596.6 申請日 -
公開（公告）號 CN103993027B 公開（公告）日 2017-09-26
申請公布號 CN103993027B 申請公布日 2017-09-26
分類號 C12N15/63(2006.01)I;C12N15/873(2010.01)I;C12N5/073(2010.01)I;A01K67/027(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李寧;孫照霖;康倩倩;李秋燕;趙蕊 申請（專利權(quán)）人 北京濟福霖生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 中國農(nóng)業(yè)大學;北京濟福霖生物技術(shù)有限公司
地址 100193 北京市海淀區(qū)圓明園西路2號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于基因工程領(lǐng)域，本發(fā)明提供了一種轉(zhuǎn)基因豬篩選標記基因敲除的方法，具體為：1）構(gòu)建自我剪切元件TmOCN；2）構(gòu)建帶有自我剪切元件的打靶載體；3）篩選陽性克隆細胞；4）體細胞克隆獲得F0代標記基因去除的陽性豬。其中剪切元件TmOCN中：TmO代表精簡的小鼠早期胚胎發(fā)育轉(zhuǎn)錄因子OCT4的特異啟動子；C代表Cre重組酶基因；N代表轉(zhuǎn)基因動物常用的neo篩選標記基因。所述自我剪切元件TmOCN在SCNT過程中的豬早期胚胎發(fā)育階段特異啟動Cre酶進行自我剪切，達到在F0代自動敲除標記基因的目的。