一種組織淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)座酶可接近性染色質(zhì)分析的建庫(kù)方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810139118.0 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN108360074A 公開（公告）日 2018-08-03
申請(qǐng)公布號(hào) CN108360074A 申請(qǐng)公布日 2018-08-03
分類號(hào) C40B50/06;C12N15/10 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 童云廣;徐鷺芹 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 奧明（杭州）基因科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 310018 浙江省杭州市江干區(qū)杭州經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)白楊街道6號(hào)大街452號(hào)2幢A1711-A1712號(hào)房
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種組織淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)座酶可接近性染色質(zhì)分析的建庫(kù)方法，本發(fā)明首先對(duì)動(dòng)物組織進(jìn)行前處理，剪碎后過濾，利用細(xì)胞分離液進(jìn)行單個(gè)核細(xì)胞分離，保證收集的單個(gè)核細(xì)胞細(xì)胞活性較高，加入DnaseI消化死亡細(xì)胞的DNA，并利用細(xì)胞洗滌液進(jìn)行洗滌，有效降低背景干擾和成本，再進(jìn)行Tn5轉(zhuǎn)座酶切反應(yīng)與純化，qPCR確定建庫(kù)所需循環(huán)數(shù)，最后對(duì)得到的單個(gè)文庫(kù)進(jìn)行等摩爾混合，采用優(yōu)化過的兩輪磁珠比例分選得到高質(zhì)量的上機(jī)文庫(kù)，為廣大科研人員研究動(dòng)物組織淋巴細(xì)胞易接近轉(zhuǎn)座酶核染色質(zhì)高通量測(cè)序提供重要的實(shí)驗(yàn)方法參考。