高效表達重組人神經(jīng)生長因子的CHO細胞株及其構(gòu)建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201110004328.7 申請日 -
公開（公告）號 CN102586190B 公開（公告）日 2014-01-01
申請公布號 CN102586190B 申請公布日 2014-01-01
分類號 C12N5/10(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C12R1/91(2006.01)N 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 劉荷中;樂偉;史權(quán)威;彭璐佳;葛艷華 申請（專利權(quán)）人 北京福睿君安科技有限公司
代理機構(gòu) 北京海虹嘉誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 北京華安科創(chuàng)生物技術(shù)有限公司
地址 100085 北京市海淀區(qū)開拓路5號2層B216
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及“高效表達重組人神經(jīng)生長因子的CHO細胞株及其構(gòu)建方法”，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。該細胞株的保藏編號為：CGMCC?No.4541，能穩(wěn)定表達具有生物活性的重組人神經(jīng)生長因子(rhNGF)。本發(fā)明還公開了構(gòu)建該CHO細胞株的方法，通過細胞轉(zhuǎn)染、基因擴增和對擴增后細胞系進行亞克隆篩選，獲得了適合無血清懸浮培養(yǎng)的高效表達單克隆細胞株。本發(fā)明同時也公開了該CHO細胞株分泌表達的重組人神經(jīng)生長因子序列，分泌的重組人神經(jīng)生長因子具有良好的生物活性，在體外可以維持PC12增殖，誘導PC12細胞分化以及刺激雞胚背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)纖維生長，為大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化制備重組人神經(jīng)生長因子奠定了良好基礎(chǔ)。