表達(dá)抗體Fab片段的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810355289.7 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN110387394B 公開(kāi)（公告）日 2022-01-11
申請(qǐng)公布號(hào) CN110387394B 申請(qǐng)公布日 2022-01-11
分類號(hào) C12P21/00（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 馮軍;黃宗慶;李樂(lè)樂(lè);吳勇;路建光;張慶彬;張友 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 上海多米瑞生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海一平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 胡丹;徐迅
地址 201203上海市浦東新區(qū)中國(guó)（上海）自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)張衡路1559號(hào)1幢2B15
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種表達(dá)抗體Fab片段的方法。具體方法是將保存的重組基因工程大腸桿菌種子，經(jīng)過(guò)活化，搖瓶培養(yǎng)，擴(kuò)大轉(zhuǎn)接至5L發(fā)酵罐中通氣攪拌培養(yǎng)，當(dāng)發(fā)酵罐中菌體OD600達(dá)到約40時(shí)，補(bǔ)加一定量的MgSO4，并降溫至25℃，繼續(xù)發(fā)酵，當(dāng)菌體OD達(dá)到約90時(shí)，加入IPTG進(jìn)行誘導(dǎo)，并流加補(bǔ)料培養(yǎng)基進(jìn)行補(bǔ)料，發(fā)酵進(jìn)行到70?90小時(shí)后，收集發(fā)酵液。本發(fā)明通過(guò)優(yōu)化發(fā)酵過(guò)程中的溶氧DO，誘導(dǎo)劑IPTG終濃度C，補(bǔ)料速度V，加入IPTG后繼續(xù)發(fā)酵的溫度T等可以大大提高抗VEGF抗體Fab片段的表達(dá)量，最高的表達(dá)量可以達(dá)到360mg/L，可大大降低抗VEGF抗體Fab片段的生產(chǎn)成本。