表達抗體Fab片段的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810355289.7 申請日 -
公開（公告）號 CN110387394B 公開（公告）日 2022-01-11
申請公布號 CN110387394B 申請公布日 2022-01-11
分類號 C12P21/00（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 馮軍;黃宗慶;李樂樂;吳勇;路建光;張慶彬;張友 申請（專利權）人 上海多米瑞生物技術有限公司
代理機構 上海一平知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 胡丹;徐迅
地址 201203上海市浦東新區(qū)中國（上海）自由貿(mào)易試驗區(qū)張衡路1559號1幢2B15
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種表達抗體Fab片段的方法。具體方法是將保存的重組基因工程大腸桿菌種子，經(jīng)過活化，搖瓶培養(yǎng)，擴大轉接至5L發(fā)酵罐中通氣攪拌培養(yǎng)，當發(fā)酵罐中菌體OD600達到約40時，補加一定量的MgSO4，并降溫至25℃，繼續(xù)發(fā)酵，當菌體OD達到約90時，加入IPTG進行誘導，并流加補料培養(yǎng)基進行補料，發(fā)酵進行到70?90小時后，收集發(fā)酵液。本發(fā)明通過優(yōu)化發(fā)酵過程中的溶氧DO，誘導劑IPTG終濃度C，補料速度V，加入IPTG后繼續(xù)發(fā)酵的溫度T等可以大大提高抗VEGF抗體Fab片段的表達量，最高的表達量可以達到360mg/L，可大大降低抗VEGF抗體Fab片段的生產(chǎn)成本。