一種NK細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201810124169.6 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN108300694B | 公開(kāi)（公告）日 | 2018-07-20 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN108300694B | 申請(qǐng)公布日 | 2018-07-20 |
| 分類號(hào) | C12N5/0783(2010.01)I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 李杰;劉振云;徐華棟;王維;程豐偉 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 蘇州一兮生物技術(shù)有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 合肥市浩智運(yùn)專利代理事務(wù)所（普通合伙） | 代理人 | 安徽古一生物科技有限公司;合肥一兮生物科技有限公司 |
| 地址 | 238000安徽省合肥市巢湖市經(jīng)濟(jì)開(kāi)發(fā)區(qū)管委會(huì)南三樓301室 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，提供了一種NK細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)方法，包括如下步驟：(1)從外周血分離單個(gè)核細(xì)胞，重懸于無(wú)血清培養(yǎng)基中，調(diào)整單個(gè)核細(xì)胞濃度，培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)過(guò)夜；(2)第2天，從培養(yǎng)液中吸出懸浮細(xì)胞，接種于細(xì)胞培養(yǎng)瓶，補(bǔ)加無(wú)血清培養(yǎng)基，同時(shí)添加抗CD16抗體、IL2和IL3；第4天，補(bǔ)加無(wú)血清培養(yǎng)基，添加IL2、IL3，繼續(xù)培養(yǎng)至第6天；(3)第7天，補(bǔ)加無(wú)血清培養(yǎng)基，添加IL15、α?半乳糖神經(jīng)酰胺，繼續(xù)培養(yǎng)至第14天；(4)離心收集NK細(xì)胞，使用流式抗體鑒定NK細(xì)胞表型。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：采用無(wú)血清培養(yǎng)方法，通過(guò)14天的體外培養(yǎng)，獲得90％純度以上、擴(kuò)增倍數(shù)80倍以上的NK細(xì)胞。?? |
