一種U6、miR92a及miR21的三重RT-qPCR檢測(cè)方法及試劑盒
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201710321897.1 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN107012241B | 公開（公告）日 | 2017-08-04 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN107012241B | 申請(qǐng)公布日 | 2017-08-04 |
| 分類號(hào) | C12Q1/686(2018.01)I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 張新;彭春梅;張曉瑋;鄧可基;樂(lè)小炎;張嘉;李家導(dǎo);陳觀芝;林敏深;林若琳;石壯壯;羅園香;莫靜嫣;李海茵;王星;王法;吳彩虹 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 東莞微量精準(zhǔn)檢測(cè)研究院有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京精金石知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 東莞微量精準(zhǔn)檢測(cè)研究院有限公司 |
| 地址 | 523808廣東省東莞市東莞松山湖高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)莞臺(tái)生物技術(shù)合作育成中心5棟3層301室 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明屬于生物檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及U6、miR 92a及miR 21三種miRNA進(jìn)行單管三重逆轉(zhuǎn)錄的檢測(cè)方法及逆轉(zhuǎn)錄后分別進(jìn)行單管雙重定量的檢測(cè)方法及試劑盒。本發(fā)明提供的試劑盒包括逆轉(zhuǎn)錄莖環(huán)引物組、定量檢測(cè)引物組和定量檢測(cè)探針組、酶系和PCR反應(yīng)試劑，使得U6、miR 92a及miR 21的逆轉(zhuǎn)錄可在同一反應(yīng)管中進(jìn)行，同時(shí)，高靈敏和高特異性的定量檢測(cè)引物序列和定量檢測(cè)探針及與之相匹配的PCR反應(yīng)程序和條件，使得miR 21和U6、miR 92a和U6可單管雙重定量，避免了現(xiàn)有技術(shù)中單管單重定量時(shí)的操作誤差，使定量更簡(jiǎn)潔準(zhǔn)確。另外，本發(fā)明引入Stoffel片段和Tfl DNA聚合酶的雙聚合酶擴(kuò)增方法，提高檢測(cè)特異性的同時(shí)，可耐受更多的模版，檢測(cè)靈敏度及結(jié)果穩(wěn)定性提高。?? |
