一種U6、miR 92a及miR 21的三重RT?qPCR檢測方法及試劑盒

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710321897.1 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN107012241A 公開（公告）日 2017-08-04
申請(qǐng)公布號(hào) CN107012241A 申請(qǐng)公布日 2017-08-04
分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張新;彭春梅;張曉瑋;鄧可基;樂小炎;張嘉;李家導(dǎo);陳觀芝;林敏深;林若琳;石壯壯;羅園香;莫靜嫣;李海茵;王星;王法;吳彩虹 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 東莞微量精準(zhǔn)檢測研究院有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京精金石專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 廣州海力特生物科技有限公司;東莞微量精準(zhǔn)檢測研究院有限公司
地址 510535 廣東省廣州市黃埔區(qū)科學(xué)城開源大道11號(hào)A7棟二層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物檢測領(lǐng)域，具體涉及U6、miR?92a及miR?21三種miRNA進(jìn)行單管三重逆轉(zhuǎn)錄的檢測方法及逆轉(zhuǎn)錄后分別進(jìn)行單管雙重定量的檢測方法及試劑盒。本發(fā)明提供的試劑盒包括逆轉(zhuǎn)錄莖環(huán)引物組、定量檢測引物組和定量檢測探針組、酶系和PCR反應(yīng)試劑，使得U6、miR?92a及miR?21的逆轉(zhuǎn)錄可在同一反應(yīng)管中進(jìn)行，同時(shí)，高靈敏和高特異性的定量檢測引物序列和定量檢測探針及與之相匹配的PCR反應(yīng)程序和條件，使得miR?21和U6、miR?92a和U6可單管雙重定量，避免了現(xiàn)有技術(shù)中單管單重定量時(shí)的操作誤差，使定量更簡潔準(zhǔn)確。另外，本發(fā)明引入Stoffel片段和Tfl?DNA聚合酶的雙聚合酶擴(kuò)增方法，提高檢測特異性的同時(shí)，可耐受更多的模版，檢測靈敏度及結(jié)果穩(wěn)定性提高。